二十七味定坤丸具有滋补气血、调经舒郁的功效，主要用于气血两虚、气滞血瘀所致的月经不调、行经腹痛等症状。其主要功效包括调理月经、缓解痛经、改善气血不足、疏肝解郁、辅助治疗更年期综合征等。
二十七味定坤丸可改善气血两虚或气滞血瘀导致的月经周期紊乱、经量异常等问题。方中当归、白芍等成分能促进子宫内膜正常脱落，适用于经期延迟、经量过少或闭经等情况。月经不调患者服用后可能逐渐恢复规律周期，但需连续用药1-3个月经周期见效。
该药对原发性痛经和继发性痛经均有缓解作用，尤适于经前小腹坠胀、经期绞痛明显者。其活血化瘀成分能减少前列腺素分泌，降低子宫平滑肌痉挛强度。部分患者在经前1周开始服用，疼痛程度可明显减轻。
对于面色苍白、头晕乏力等气血亏虚症状，方中人参、黄芪等补气药与熟地黄、阿胶等补血药协同作用，可提升血红蛋白含量，改善末梢循环。部分亚健康人群服用后体力、面色及精神状态可见好转。
柴胡、香附等成分具有调节中枢神经系统功能的作用，能缓解因肝气郁结导致的经前烦躁、乳房胀痛等症状。临床观察显示，该药对轻度焦虑抑郁情绪有一定调节效果，需配合心理疏导效果更佳。
对于更年期女性出现的潮热盗汗、失眠心悸等症状，该药通过平衡性激素间接调节自主神经功能。部分围绝经期患者配合谷维素片使用，可减少血管舒缩症状发作频率，但严重更年期综合征仍需联合激素治疗。
服用二十七味定坤丸期间应忌食生冷油腻，感冒发热时暂停使用。建议饭后温水送服，疗程通常为2-3个月。需注意该药含活血成分，孕妇禁用，糖尿病患者慎用。服药期间定期复查肝肾功能，若出现口干便秘等反应应减量或就医。月经病患者用药期间建议记录经期变化，配合适量有氧运动如八段锦锻炼，避免过度劳累和情绪波动。
