梅毒试纸的准确率一般在85%-95%之间，实际检测结果受试纸品牌、操作规范性、感染阶段、样本类型、检测时机等因素影响。
市售梅毒试纸多采用胶体金免疫层析法，对梅毒螺旋体抗体进行检测。主流品牌试纸对一期梅毒的检出率约70%-85%，二期梅毒可达95%以上，潜伏期梅毒约90%。血液样本准确率通常高于唾液样本，静脉血检测优于指尖采血。
操作不当可能导致假阴性或假阳性。采血量不足、加样时间过长、结果判读超时等操作失误会降低准确性。窗口期感染后2-4周内检测可能出现假阴性，此时需结合梅毒螺旋体明胶凝集试验TPPA或化学发光法复检。
自身免疫疾病患者可能出现假阳性，需通过梅毒甲苯胺红不加热血清试验TRUST或快速血浆反应素试验RPR验证。试纸检测阳性者应到皮肤性病科进行专业实验室确诊，阴性结果但存在高危行为者建议间隔4周复测。
