儿童青光眼的诊断需结合临床表现、眼压测量及眼部结构检查综合判断。儿童青光眼分为原发性先天性青光眼和继发性青光眼两类，诊断标准主要依据眼压异常升高、视神经损害特征及特征性眼部改变。
眼压测量是诊断的核心指标。正常儿童眼压范围为10-21毫米汞柱，若多次测量结果超过21毫米汞柱需警惕。婴幼儿需在全麻下使用手持式眼压计测量，学龄儿童可采用非接触式眼压计。眼压昼夜波动大于5毫米汞柱具有诊断意义。
特征性眼部改变包括角膜直径增大新生儿超过11毫米、角膜水肿混浊、后弹力层破裂形成的Haab纹。眼底检查可见视杯扩大杯盘比大于0.3，进行性视神经纤维层变薄。前房角镜检查显示房角发育异常是原发性先天性青光眼的典型表现。
辅助检查包括超声生物显微镜评估房角结构，光学相干断层扫描监测视神经纤维层厚度变化。视野检查适用于能配合的学龄儿童，早期可发现旁中心暗点。基因检测对某些综合征相关青光眼有确诊价值。
诊断需排除角膜混浊的其他病因如先天性角膜营养不良，鉴别继发性青光眼的原发病因如葡萄膜炎、眼外伤等。对于可疑病例建议转诊至儿童眼科专科中心，通过多模态影像检查实现早期诊断。
